产品货号：
SNM082
中文名称：
脯氨酸测定试剂盒(比色法)
英文名称：
proline assay kit
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒可用于检测植物组织样本中脯氨酸的含量。
植物体内的氨基酸只有脯氨酸能与酸性茚三酮发生反应，生成稳定的红色产物。该产物在515nm有一最大吸收高峰，其吸收值与脯氨酸的含量呈直线关系。因此，样品中的脯氨酸含量可用酸性茚三酮法测定。除脯氨酸外，酸性和中性氨基酸不能与酸性茚三酮形成红色产物，碱性氨基酸对这一反应只有轻度干扰，在同类样品的测定中可忽略不计，在不同样品的测定中可加入人造沸石排除这种干扰。
5μg/mL标准品应用液的配制：取100μg/mL的标准贮备液0.5mL用试剂一定容至10mL；或直接按标准品贮液：试剂一为1：19的比例进行配制，即5μg/mL标准品应用液。
W：组织湿重(g);
V样总：提取液总体积；
N：样本测试前稀释倍数。
附录I：脯氨酸标准曲线的制备
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植物体内的氨基酸只有脯氨酸能与酸性茚三酮发生反应，生成稳定的红色产物。该产物在515nm有一最大吸收高峰，其吸收值与脯氨酸的含量呈直线关系。因此，样品中的脯氨酸含量可用酸性茚三酮法测定。除脯氨酸外，酸性和中性氨基酸不能与酸性茚三酮形成红色产物，碱性氨基酸对这一反应只有轻度干扰，在同类样品的测定中可忽略不计，在不同样品的测定中可加入人造沸石排除这种干扰。
脯氨酸proline是一种环状的亚氨基酸，在组成蛋白质的常见20种氨基酸中唯一的亚氨基酸。脯氨酸(Pro)是植物蛋白质的组分之一，并可以游离状态广泛存在于植物体中。同时脯氨酸也是植物逆境胁迫较敏感的指标之一。
脯氨酸（Pro）是植物蛋白质的组分之一，并可以游离状态广泛存在于植物体中。在干旱、盐渍等胁迫条件下，许多植物体内脯氨酸大量积累。积累的脯氨酸除了作为植物细胞质内渗透调节物质外，还在稳定生物大分子结构、降低细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化还原势等方面起重要作用。
在逆境条件下（旱、盐碱、热、冷、冻），植物体内脯氨酸的含量显著增加。植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。另外，由于脯氨酸亲水性极强，能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程，因而能降低凝固点，有防止细胞脱水的作用。在低温条件下，植物组织中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作为抗寒育种的生理指标。
- 快速简便：全程约1小时，可测50例左右样本。
- 稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效。
- 再现性好：变异系数CV=1.9%。
- 回收试验：X =97%。
| 组分 | 规格 |
| 试剂一 | 60mL×2 |
| 试剂二：缓冲液 | 60mL |
| 试剂三：显色剂 | 60mL |
| 100μg/mL标准贮备液 | 1mL |
5μg/mL标准品应用液的配制：取100μg/mL的标准贮备液0.5mL用试剂一定容至10mL；或直接按标准品贮液：试剂一为1：19的比例进行配制，即5μg/mL标准品应用液。
- 操作最好在通风厨内操作、最好戴口罩与手套。
- 用试剂一提取后的样本无法用于测定其它指标。
- 前处理：精确称取植物组织重量，按重量(g)∶体积(mL)＝1∶9的比例，加入9倍体积的试剂一，冰水浴条件下机械匀浆，制成10%的组织匀浆液，3500转/分，离心10分钟，取上清液待测；
- 按下表加入各成分配制反应体系：
成分 空白管 标准管 测定管 试剂一 0.5mL 5μg/mL标准品应用液 0.5mL 待测样本 0.5mL 试剂二 1mL 1mL 1mL 试剂三 1mL 1mL 1mL - 沸水浴30分钟，流水冷却，双蒸水调零，1cm光径，520nm比色。
| 脯氨酸含量 (μg/g组织湿重) | ＝ | A测定－A空白 | ×C标准÷ | W | ×N |
| A标准－A空白 | V样总 |
W：组织湿重(g);
V样总：提取液总体积；
N：样本测试前稀释倍数。
附录I：脯氨酸标准曲线的制备
- 前处理：
将100μg/mL标准品贮备液用试剂一按照100倍、50倍、25倍、20倍、12.5倍、10倍、5倍进行稀释后，取500μL进行测定。 - 操作表：
成分 空白管 标准管 试剂一 0.5mL 不同浓度脯氨酸标准品 0.5mL 试剂二 1mL 1mL 试剂三 1mL 1mL 沸水浴30分钟，流水冷却，蒸馏水调零，1cm光径，波长520nm比色。 - 绘图如下：
注：标准曲线用户可以不做，直接使用计算公式计算即可。
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